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異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質(zhì),常用于藍白斑篩選及誘導的細菌內(nèi)的蛋白表達等。當pUC系列的載體DNA(或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉(zhuǎn)化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉(zhuǎn)染時,如果在平板培養(yǎng)基中加入X–Gal和本產(chǎn)品,由于β–半乳糖苷酶的α–互補性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體
X-gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會產(chǎn)生藍色產(chǎn)物?;谶@個特點,當pUC系列載體DNA以lacZ 缺欠細胞作為宿主進行轉(zhuǎn)化時,或M13噬菌體載體DNA進行轉(zhuǎn)染時,如果在培養(yǎng)基中加入本產(chǎn)品和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互補性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色而方便地挑選擇出基因重組體。
氯霉素(Chloramphenicol)是一種廣譜抗生素,通過與50S核糖體亞基結(jié)合,抑制氨酰-tRNA連接到核糖體,阻斷肽酰轉(zhuǎn)移酶步驟,從而抑制蛋白質(zhì)合成,還能抑制葉綠體和線粒體蛋白質(zhì)合成,和核糖體產(chǎn)生(p)ppGpp,抑制RNA轉(zhuǎn)錄,通常用作一種抑菌劑。有效作用于各種革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌,特別是引起腦膜炎的細菌,常用來研究蛋白質(zhì)合成和篩選氯霉素抗性基因的轉(zhuǎn)化。
鏈霉素(Streptomycin)是一種氨基糖苷類抗生素,通過與30S核糖體結(jié)合致使mRNA誤讀,從而抑制蛋白質(zhì)的合成。對革蘭氏陽性菌和陰性菌均有效。鏈霉素可在細胞培養(yǎng)中抑制細菌污染;分子生物學中,常用來篩選成功轉(zhuǎn)化鏈霉素基因的細菌克隆。
羧芐青霉素(Carbenicillin)是一種結(jié)構(gòu)類似青霉素的β-內(nèi)酰胺類抗生素。不同于大多數(shù)β-內(nèi)酰胺,此抗生素主要作用于包括銅綠假單胞菌和常見腸道菌在內(nèi)的革蘭氏陰性菌。其作用機制在于失活細菌細胞膜內(nèi)部的轉(zhuǎn)肽酶,進而抑制細菌細胞壁的合成,終導致細菌死亡。因其穩(wěn)定性提高,常替代青霉素用于篩選步驟,能有效減少衛(wèi)星菌落生成。另外,常用在植物培養(yǎng)中,以調(diào)解細菌生長,使其再生頻率顯
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